水果、蔬菜制品銅含量的測定——光度法

本標準等效采用國際標準ISO 3094-1974《水果、蔬菜制品 銅含量的測定--光度法》 。

1 主題內容與適用范圍 本標準規定了水果、蔬菜制品銅含量測定方法。本方法適用于水果、蔬菜制品,包括各種醬、泥、果汁和蔬菜汁等銅含量的測定。 注：鉍和碲干擾本方法測定。

2 引用標準 GB 12283 水果、蔬菜及制品中有機物的分解方法

3 原理 樣品中的有機物被分解后,用堿溶液中和分解時的酸溶液試樣中的銅離子與二乙基二硫代氨基甲酸鈉作用,生成棕黃色絡合物,用三氯甲烷或四氯化碳提取銅絡合物,測定該絡合物的呈色強度。推薦閱讀>>什么殼二糖標準品？

4 試劑 所有的試劑均為分析純。均使用蒸餾水或相同純度的水。

4.1 三氯甲烷或四氯化碳(GB 682或GB 688),無碳酸。

4.2 無水甲醇(GB 683)。

4.3 氨水(GB 631),比重0.88g/mL。

4.4 檸檬酸銨-乙二胺四乙酸鈉鹽溶液 溶解20g檸檬酸銨(Q/HG 12-256)和5g乙二胺四乙酸鈉鹽(GB 1401)于水中并稀釋 至100mL。

4.5 二乙基二硫代氨基甲酸鈉(HG 3-962)溶液5g/L 在25～30℃水浴中加熱可加快試劑溶解。本溶液應在一周內使用,在冰箱中保存。

4.6 銅標準溶液相當于0.01g/L。 溶解0.196g硫酸銅(CuSO4·5H2O)于水中,加幾滴比重1.84g/mL的硫酸,用水稀釋至 500mL,混勻。再分取10mL,用水稀釋至100mL,本溶液含銅10μg/mL。

4.7 百里酚藍指示劑(C27H2905SNa) 加溫溶解0.1g百里酚藍于8.6mL的0.1 mol/L氫氧化鈉溶液和10mL的96%(υ/υ)乙 醇中,用20%(υ/υ)乙醇稀釋至250mL。

5 儀器、設備

5.1 短頸分液漏斗;

5.2 分光光度計 備有 10或20mm比色杯,在波長435nm測定。

6 分析步驟

6.1 試樣分取和有機物分解 參見GB 12283。 有機物分解前,樣品在磨碎和過篩時應避免使用銅制品設備。

6.2 銅絡合物的形成和提取 預計樣品中銅含量低于50μg時,則使用全部溶液(6.1),預計樣品中銅含量較高時,用水稀釋溶液(6.1)至100mL并從中適量分取。 分解液冷卻后,用30～40mL水稀釋溶液,把溶液轉入分液漏斗(5.1),依次加入20mL檸檬酸銨-乙二胺四乙酸鈉鹽(EDTA)溶液(4.4)、5mL氨水溶液(4.3)、2滴百里酚藍指示劑(4.7)和足量的氨水溶液(4.3),使溶液的顏色由黃變藍(pH8至9.6)。在流水中冷卻,不時的松動分液漏斗瓶塞。加入2mL二乙基二硫代氨基甲酸鈉溶液(4.5),準確加入10mL三氯甲烷或四氯化 碳(4.1),振搖5min,靜置分層。用濾紙或脫脂棉擦干分液漏斗。把含銅絡合物的三氯甲烷或四氯化碳提取液放到試管中,避光保存。放置片刻使痕量水分出來,經濾紙過濾到另一試管中以除去痕量水。加入0.5mL無水甲醇(4.2),測定前在暗處放置2h,在亮處放置1h(避免直射光)。

6.3 空白試驗 按6.1和6.2樣品測定方法同時進行,但不加樣品。

6.4 測定 用分光光度計(5.2),以空白試驗(6.3)為對照,在435nm處測定三氯甲烷或四氯化碳提取 液(參見6.2)中銅絡合物的顏色強度。

6.5 標準曲線的繪制 進行有機物分解后,吸取1,2,3,4,5mL銅標準溶液(4.6),分別含10,20,30,40,50μg銅, 同樣按試樣的方法處理,分別進行測定。吸光度值與對應的銅微克數繪制標準曲線。 同時按6.3配制空白溶液并按6.4進行測定。標準曲線與試樣測定液同時制備時,無須單獨做空白溶液。

7 結果表示

7.1 計算方法和公式 按標準曲線把6.4的測量值換算成銅的微克數。樣品中銅含量(mg/kg),按下式計算:

100   C

銅(mg/kg)=───×───

υ    m

式中:υ--從溶液(6.1)中用于測定的體積,mL; C--標準曲線上查得的銅含量,μg; m--樣品的質量,g。 取兩次算術平均值作為分析結果。

7.2 允許差 同一分析者同時或快速連續進行兩次測定其結果的差異,銅含量小于或等于5mg/kg時,不超過0.2mg/kg,銅含量更高時,平均值不超過5%。

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附加說明:

本標準由中華人民共和國農業部提出。

本標準由中國農業科學院分析測試中心負責起草。

本標準主要起草人李偉格、陳必芳、顧君華。