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化玻儀器之什么是酶標板,酶標板究竟有多少種類?

時間: 2019-06-01 來源:西安斯坦利化學商城1

化玻儀器之什么是酶標板,酶標板究竟有多少種類?酶標板(ELISA PLATE)在酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme Linked Immunosorbent Assay,ELISA)中,參與免疫學反應的抗原、抗體、標記抗體或抗原的純度、濃度和比例;緩沖液種類、濃度和離子強度、pH值和反應溫度、時間等條件起著關鍵作用。

 

化玻儀器之什么是酶標板,酶標板究竟有多少種類?根據(jù)不同的分類標準,酶標板有著不同的分類。

 

一、根據(jù)孔數(shù),可分為96孔、48孔,其中96孔是現(xiàn)在最常用的,因為酶標板就是配合酶標儀用,現(xiàn)在的酶標儀做出來的最多的是96孔,所以客戶在購買時也是要96孔板,廠家也為了適應市場基本上做出來的就是96孔的。

 

二、根據(jù)其底部的不同,又分為平底的,U型底、V型底。平底的折射率低,適于在酶標儀檢測;U型底的酶標板折射率較高,方便加樣、吸樣、混勻等操作,可以不用放在酶標儀上,直接通過目測觀察顏色變化情況,從而判定有無相應的免疫反應。V底的酶標板可以精確的吸取樣品。

 

三、根據(jù)酶標板與蛋白和其它分子結合能力的不同,又分為高結合力,中結合力和氨基化的。

 

1)高結合力

 

此種酶標板,表面經處理后,其蛋白結合能力大大增強,可達300~400ng IgG/cm2,主要結合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標板可提高敏感性,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產生非特異性反應??乖蚩贵w包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位,需使用蛋白作為封閉劑。

 

2) 中結合力

 

此類酶標板經表面疏水鍵被動與蛋白結合,適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結合能力為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可降低潛在的非特異性交叉反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。

 

3)氨基化

 

化玻儀器之什么是酶標板,酶標板究竟有多少種類?這種酶標板經表面改性處理后擁有帶正電荷的氨基,其疏水鍵由親水鍵取代。該類酶標板適合作為小分子蛋白的固相載體。使用合適的緩沖液和pH值,其表面可通過離子鍵與帶負電荷的小分子結合。由于其表面的親水特性和可通過其它交聯(lián)劑共價結合的能力,可用于固定溶于Triton-100、Tween 20等去污劑的蛋白分子。該類板的缺陷為由于降低了疏水性,一部分蛋白分子無法結合;此外,其表面需有效地封閉。由于親水和共價的表面特性,使用的封閉液必須能夠與非反應性氨基基團和所選擇的交聯(lián)劑中任何功能基團發(fā)生作用。

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