生化試劑交叉污染怎么辦？西安化學(xué)試劑商城認(rèn)為全自動生化分析儀由于其清洗系統(tǒng)的工作模式所致，常出現(xiàn)一個(gè)項(xiàng)目對緊隨其后的一個(gè)甚至幾個(gè)項(xiàng)目的測定帶來一定程度的試劑污染，并隨著儀器使用時(shí)間的累加，儀器狀況的下降，試劑交叉污染的程度會有所增加。在實(shí)際工作中主要表現(xiàn)為某一項(xiàng)目的測定結(jié)果一直符合臨床要求，可是一段時(shí)間以后測定結(jié)果趨高，并且日益明顯;而單獨(dú)測定該項(xiàng)目時(shí)測值又合理起來，給日常工作帶來極大的不便。因此避免試劑間的干擾非常重要。

生化試劑交叉污染怎么辦？試劑間的干擾原因

1、試劑中含有下一測試所要測定的底物，或是含有的某種試劑成分與下一反應(yīng)所要測定的底物有作用，因而直接干擾下一反應(yīng)的測定結(jié)果;

2、該試劑所引導(dǎo)的反應(yīng)對下一項(xiàng)目的反應(yīng)進(jìn)程帶來了間接的干擾，因?yàn)樵谟性噭┪廴镜那闆r下，下一項(xiàng)目所測定的是前后兩個(gè)項(xiàng)目反應(yīng)的綜合作用結(jié)果。下面通過對試劑成分的分析和相應(yīng)試驗(yàn)來找出試劑交叉污染可能帶來的情況，進(jìn)而指導(dǎo)相應(yīng)的項(xiàng)目調(diào)整和結(jié)果分析。

生化試劑交叉污染怎么辦？試劑間可能發(fā)生的干擾情況

1、ALT(IFCC)、AST(IFCC)試劑中含有高活力LD成分，有可能會對LD的測定帶來干擾;

2、ALP(IFCC)、CK(NAC-activated)、CK-MB(NAC-activated)、CO2(PEPC)、α-Amy(EPS)等試劑中使用磷酸緩沖液，可能會對其后的Mg2+ 測定帶來干擾;

3、ChE(Butyrylthiocholine)、TC(ChOD-PAP)、Glu(GOD-PAP)、 UA(Uricase)、 α-HBDH(DGKC)等試劑使用磷酸緩沖液，可能會對無機(jī)磷的測定帶來干擾;

4、CK(NAC-activated)、CK-MB(NAC-activated)試劑中含有Glu成分，其分析方法的原理中包含Glu的已糖激酶(HK)反應(yīng)過程，因此可能對Glu測定帶來干擾，尤其對Glu的HK法測定可能帶來嚴(yán)重干擾;

5、Mg2+試劑 (Calmagite)中含有EGTA成分，為Ca2+絡(luò)合劑，可能對Ca2+的測定帶來干擾;

6、個(gè)別試劑以甘油做酶的保護(hù)劑，因此可能對TG的測定帶來干擾，等等;

7、低密度脂蛋白、甘油三酯、膽固醇的試劑成分中都含有CE、CHOD、POD酶，都會與血清成分反應(yīng)，生成的中間反應(yīng)產(chǎn)物是H2O2濃度,因?yàn)榈兔芏戎鞍缀透视腿z測單位都是mmol/L級,而尿酸檢測單位是μmol/L級,二者之間相差1 000倍,故檢測尿酸的反應(yīng)杯中只要?dú)埩魳O少量的低密度脂蛋白和膽固醇試劑就可產(chǎn)生大量的H2O2,直接導(dǎo)致尿酸的檢測結(jié)果的升高;

8、葡萄糖對尿酸試劑的干擾GLU(OX)與UA測定原理均采用Trider's反應(yīng)方法,試劑探針殘留攜帶的GLU帶入到UA反應(yīng)體系,發(fā)生血糖反應(yīng)其產(chǎn)物紅色醌亞胺與UA產(chǎn)物紅色醌亞胺顏色疊加,而血清中正常血糖含量遠(yuǎn)高于尿酸水平,從而導(dǎo)致UA結(jié)果嚴(yán)重偏高;

9、膽固醇(TC)、甘油三醋(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL)及低密度脂蛋白膽固醇(LDL) 會對總膽汁酸檢測的影響，導(dǎo)致膽汁酸測定值增加。這些試劑中為了保證反應(yīng)充分，往往含有膽酸鈉成分或是一些脂類水解促進(jìn)劑等，這些物質(zhì)導(dǎo)致了樣本膽汁酸測定的攜帶性增高及內(nèi)源產(chǎn)物等副反應(yīng)性增高;

10、谷丙中的含有的酮戊二酸NADH反應(yīng)體系會干擾總膽汁酸檢測中的Thio-NAD-Thio-NADH循環(huán)指示體系，導(dǎo)致測定值偏低;

由于各個(gè)試劑公司所提供的產(chǎn)品說明書常不能全面反映試劑的組成情況，所以通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)試劑交叉污染可能帶來的干擾變得很重要。下面以兩個(gè)試驗(yàn)來加以說明:

A、將試劑作為樣本進(jìn)行全套項(xiàng)目測定，根據(jù)結(jié)果確定發(fā)生試劑交叉污染時(shí)造成直接干擾的項(xiàng)目。

B、將一份樣本分為兩份，一份加生理鹽水或其他適當(dāng)?shù)南♂屢海硪环菁拥攘康脑噭瑫r(shí)測定、考察結(jié)果的變化，進(jìn)而確定可能發(fā)生試劑交叉污染時(shí)造成干擾的項(xiàng)目。進(jìn)行這一實(shí)驗(yàn)時(shí)，使用半自動生化分析儀可能會得到更為理想的結(jié)果，尤其是針對雙試劑反應(yīng)時(shí)， R1、R2加入時(shí)機(jī)可以得到更為精確的控制。

此外，由于試劑成分的復(fù)雜多樣性，實(shí)時(shí)儀器狀況的獨(dú)特性，可能發(fā)生的試劑間的交叉污染的情況不盡相同。

試劑間的交叉污染會影響結(jié)果的準(zhǔn)確性，因此隔絕二者間的聯(lián)系非常重要。一般在安排項(xiàng)目順序時(shí)要求兩個(gè)項(xiàng)目間至少要有一個(gè)非干擾項(xiàng)目，而最徹底的做法則是將被干擾項(xiàng)目置于干擾項(xiàng)目之前以消除干擾。同時(shí)要求檢驗(yàn)人員對儀器的工作狀態(tài)要了如指掌，并在一個(gè)樣本的項(xiàng)目選擇或一個(gè)樣本的最后一項(xiàng)與下一樣本的第一個(gè)項(xiàng)目選擇時(shí)對于試劑交叉污染的可能性加以考慮，合理安排項(xiàng)目順序，以便得到更為合理的結(jié)果。

通常情況下可以按照以下順序安排項(xiàng)目：ALT 、AST、 ALP、γ–GT 、ChE 、TP、 Alb 、TBIL、 DBIL 、Urea、 UA 、Cr、 CK 、CK-MB、α–HBDH 、LD、 Glu 、TG 、TC、 HDL-C、 LDL-C、ApoAI、ApoB、α–Amy 、CO2 、P3-、Fe3+、Ca2+、Mg2+。

實(shí)際工作中，用全自動生化分析儀進(jìn)行連續(xù)的多個(gè)項(xiàng)目的測定，每個(gè)反應(yīng)的詳細(xì)過程難以探知，因此理論分析結(jié)合實(shí)際應(yīng)用方可摸索出符合本單位工作的方法。