一、洗滌

1、玻璃器皿的洗滌

1.1 浸泡

新瓶使用前應先用自來水簡單刷洗,然后用稀鹽酸溶液(5%)浸泡過夜;培養后的玻璃器皿用后要立即浸入清水中;注意:讓水能完全進入瓶皿中,不應留有氣泡。

1.2 刷洗

浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗滌劑洗滌(宜選用軟毛刷和優質的洗滌劑,如高級洗衣粉或洗潔精),絕對不能使用含沙粒的去污粉!洗刷時特別注意洗刷瓶角部位。

1.3 浸泡

器皿要充滿清潔液,勿留氣泡.浸泡時間不應少于6小時;一般應浸泡過夜。

1.4 沖洗

刷洗和浸酸后都必須用水充分沖洗,使之不留任何殘跡.沖洗宜用洗滌裝置,以保證沖洗效果,如用手工操作,每瓶都得用水灌滿,倒掉,重復十次以上,最后再用蒸餾水漂洗2～3次,涼干備用。

2、膠塞的清洗

新購置的膠塞先用自來水沖洗干凈后,再做常規處理。

3、塑料器皿的清洗

目前我國培養使用的塑料器皿主要是從國外購置的,是一種無毒并已經消毒過滅菌密封包裝的商品.用時,只要打開包裝即可,是一次使用性物品.必要時,用后經無菌處理后 ,尚可反復使用2～3次,但不宜過多.再用時仍然需要清洗和滅菌處理.塑料器皿質地軟,不宜用毛刷刷洗,造成清洗困難.為此使用中一是防止劃痕,二是用后要立即浸入水中,嚴防附著物干結;如殘留有附著物,可用脫脂棉清拭掉,用流水沖洗干凈,涼干、再用2%NaOH液浸泡過夜,用自來水充分沖洗,然后 用5%鹽酸溶液浸泡30分鐘,最后用自來水沖洗和蒸餾水漂洗干凈,涼干后備用。

二、消毒

1.紫外線消毒

紫外線直接照射法很方便,效果好,是目前各實驗室常用的消毒法。

【適用范圍】空氣、操作臺表面和一些不能使用其它方法進行消毒的培養器皿(如塑料培養皿、培養板等)

【要求】(1)培養室的紫外線燈應距地面2.5米,使每平方厘米有0.06微瓦能量的照射,才能發生有效的消毒作用.(2)由于各種細菌對紫外線的敏感性不同,所用照射時間和劑量也不同。

【缺點】(1)產生臭氧,污染空氣,對身體有害;(2)射線照射不到的部位起不到消毒作用,故消毒時,物品不宜相互遮擋。

【注意】 有人習慣于邊照射邊進行實驗操作,這樣不好,一是紫外線對細胞、試劑和培養液都有不良影響,二是對人體皮膚也有傷害。

2.濕熱消毒

濕熱消毒即高壓蒸汽消毒,是最有效的一種方法。

【適用范圍】布類、膠塞、金屬器械、玻璃器皿及某些培養用液。

【要求】：培養用液、橡膠制品 10磅10分鐘 。布類、玻璃制品、金屬器械等 15磅20分鐘。

3.濾過消毒

【適用范圍】 大多數培養用液,如人工合成培養液、血清、酶溶液等(這些在高溫下會發生變性,失去其功能,必須采用濾過法除菌。

【常用濾器】 Zeiss濾器、微孔濾膜濾器及各種不同規格的一次性濾器.常用孔徑0.22um濾膜過濾一般用液即可。

【注意】

(1)濾膜用后丟棄,濾器清洗也比較方便,先用毛刷蘸洗滌劑刷洗干凈,用自來水沖洗后,再用蒸餾水沖洗,涼干即可;

(2)用前再裝上一張新的濾膜;

(3)消毒時旋鈕不要扭太緊,凡與空氣接觸部位都用紙包裝好,以保證消毒時的效果;

(4)消毒后,在無菌環境中立即將旋鈕扭緊;

(5)濾過少量液體時,用一種能安裝在注射器上的小濾器,使用相同的濾膜,濾過時把濾過物裝入注射器針管內,壓出過濾物注入無菌容器中即.