如何提取DNA?DNA提取原理與dna提取方法那點事

核酸(nucleic acid)在生物界中堪稱主宰，是一類非常重要的生物大分子，它在生物的繁衍、發育、維持、衰老和死亡等一切生命活動中扮演著重要的角色，如果其結構出現稍許的變動，比如一個堿基的差錯、缺失或增加，就有可能導致突變、缺陷或疾病的出現，所以核酸已成為生物化學、遺傳學以及其他有關生命學科的熱門研究課題，其覆蓋面之廣、進展之速為其他學科所望塵莫及。

DNA是什么?

如何提取DNA?DNA提取原理與dna提取方法那點事!脫氧核糖核酸(縮寫為DNA)，是一種生物大分子，是以4種脫氧核苷酸為單位連接而成的長鏈，這4種脫氧核苷酸分別含有A,T,C,G四種堿基。主要功能是貯存決定物種的所有蛋白質和RNA結構的全部遺傳信息;策劃生物有次序地合成細胞和組織組分的時間和空間;確定生物生命周期自始至終的活性和確定生物的個性。

DNA有哪些種類?

一、染色體DNA

原核生物和真核生物均含有染色體DNA，基因組大小物種間差異較大。

二、線粒體DNA

這是真核生物特有的染色體外遺傳物質，含有與呼吸作用相關的基因。已知的是哺乳動物的線粒體基因組最小(如人的線粒體16.5 kb左右)果蠅和蛙的稍大，酵母的更大，而植物的線粒體基因組最大(最小的為100kb左右)。

三、葉綠體DNA

這是真核生物特有的染色體外遺傳物質，含有與光合作用相關的基因。高等植物葉綠體的DNA為雙鏈共價閉合環狀分子，其長度隨生物種類而不同，其大小在120kb~217kb之間。

四、質粒DNA

質粒(Plasmid)是一類存在于細菌和真菌細胞中獨立于核區DNA而自主復制的共價、閉合、環狀雙鏈DNA分子，其大小通常在1~100Kb范圍內。

五、病毒&噬菌體DNA

活細胞內專性寄生，基因組相差較大，如乙肝病毒DNA只有3kb大小，T4噬菌體的基因組約165kb。

DNA提取的原則

1、保證DNA一級結構的完整性;

2、提取的DNA樣品中不應存在對酶存在抑制作用的有機溶劑及過高濃度的金屬離子;

3、其他生物大分子如蛋白質、多糖和脂類分子的污染應降低到最低程度;

4、排除其它核酸分子(RNA)的污染。

常用基因組DNA提取方法

一、CTAB法

CTAB(十六烷基三甲基溴化銨)，是一種陽離子型表面活性劑，可溶解細胞膜使細胞裂解。在高鹽溶液中(>0.7mol/L NaCl)，CTAB可與蛋白質和中性多糖形成復合物而沉淀，不能沉淀核酸和酸性多糖，另外它還能保護DNA不受內源核酸酶的降解。CTAB法是植物基因組DNA最經典的提取方法。

二、CTAB+過柱法

核酸純化柱(Spin column)可以用于各種材料的DNA\RNA的提取以及精制。具有操作簡單、回收率高、性能穩定等特點，目前產品已經為國內外大多數實驗室和公司使用。核酸純化柱(Spin column)采用硅膠膜作為核酸的特異性吸附材料，而對其他生物材料基本不吸附，可以保障最大程度地回收樣品中的DNA\RNA，同時去除其他雜質。對于雜質組份不清楚，雜質含量較多的樣品，可考慮采用CTAB裂解，然后過柱純化的方式進行提取，一般可顯著改善提取樣品的純度。

三、SDS法

SDS(十二烷基硫酸鈉)是一種陰離子型表面活性劑，可使細胞膜崩解，與膜蛋白疏水部分結合并使其與膜分離，高濃度的SDS還可以破壞蛋白質中的離子鍵和氫鍵等非共價鍵，甚至改變蛋白質的構象。SDS法適用于動物組織、血液、細胞、細菌和酵母等DNA的提取。

四、環境微生物提取方法

環境微生物(Environmental microorganism)通常是指大量的、極其多樣的存在于自然界的一大群體形微小、結構簡單、肉眼直接看不見，必須借助光學顯微鏡或電子顯微鏡放大數百倍、數千倍，甚至數萬倍才能觀察到的微小生物。