超濾離心管常見問題解決方案有哪些?斯坦利生物科技有限公司,主要兩用干燥箱培養箱,以及各種實驗儀器、化學試劑、玻璃儀器,是一家在陜西地區具有規模的化玻儀器專業公司,為您專業解答。
Q:
低濃度樣品如何選擇超濾離心管
A:
如果樣本濃度低,體積大,可選擇較小溶積的超濾離心管重復加樣離心,如果同時需要脫鹽和去除可溶性小分子雜質,可將待濃縮樣品稀釋到超濾離心管,大體積再離心,重復兩次可去除99%的鹽。
Q:
超濾離心時注意事項
A:
避免過長時間或者高速離心,雖然我們產品有防死端設計,可避免過度離心造成膜表面干燥而造成不可逆吸附,避免過度濃縮,終體積越小,越容易因表面吸附而損失得率,離心后采用輕輕吹吸幾次濾膜截留的溶液,必要時補加一定體積的緩沖液沖洗膜表面,有助于減少膜表面吸附,能提高回收率,盡量避免TIPS接觸膜表面。
Q:
特異性吸附蛋白濃縮
A:
超濾離心管通常不需要預處理即可使用,不過對于蛋白質樣本處理,特別是較稀的蛋白溶液來說(<10ug/ml),用超濾膜濃縮,回收率常常是不定量的,雖然PES材料使非特異性吸附最小化,但是,某些蛋白,特別是稀的時候會有問題,非特異性結合的程度隨著個別蛋白結構的不同而不同,含有帶電的或者疏水結構的蛋白質更易于不可逆結合到不同表面。
Q:
超濾管的鈍化處理
A:
對于超濾離心管表面做鈍化預處理可降低蛋白質在膜表面的吸附性損失,大多數情況下,在濃縮稀釋蛋白溶液之前預處理柱子可以提高回收率,因為溶液可填滿膜和表面暴露的空白蛋白吸附位點,鈍化的方法是預先用高容積的鈍化溶液預浸泡柱子1小時以上,蒸餾水徹底沖洗柱子,再用蒸餾水離心一次以徹底除去可能殘留在膜上的鈍化溶液,注意鈍化處理后別讓膜干了,如果要留待以后使用,需要加無菌蒸餾水保持膜濕潤,常用的鈍化溶液可聯系我們的工程師。
Q:
如何選擇膜孔徑及轉速
A:
超濾離心管因為需要高速離心,某些剪切力或壓力誘導下易變性的不穩定樣品可能不大適合,另外超濾膜上孔徑是平均孔徑,膜容易堵塞,對于有微小顆?;蛘咚槠臉悠罚詈孟扔幂^大孔徑的超濾管過濾一次,再進行下一步濃縮。
Q:
超濾管能進行低溫濃縮嗎
A:
膜材質和塑料外殼能耐受低溫,過濾時間跟料液溫度有關,如果溫度較低,建議濃縮時間延長。