實(shí)驗(yàn)室采購超濾離心管有哪些問題
時間: 2020-12-25 來源:西安斯坦利化學(xué)商城1
由于超濾管使用不恰當(dāng)或是超濾知識缺乏引起的問題,簡直成了實(shí)驗(yàn)汪們蛋白實(shí)驗(yàn)不成功、效率低下的最常見原因之一,斯坦利化學(xué)商城為您解答。
Q:
超濾管的正確使用方法及保存?
A:
超濾管在使用前應(yīng)用純化水進(jìn)行初離心,以驗(yàn)證其完整性,每次使用完成后,要求濕態(tài)保存,防止膜干燥。
Q:
超濾管如何進(jìn)行去內(nèi)毒素處理?
A:
我們提供的超濾管沒有經(jīng)過內(nèi)毒素處理,同時由于內(nèi)毒素通在自然界廣泛存在,對內(nèi)毒素有要求的樣品,可在實(shí)驗(yàn)前先用0.5N的氫氧化鈉預(yù)清洗,隨后用RO水清洗以去除大部分內(nèi)毒素。
Q:
濃縮后的蛋白做下游分析時發(fā)現(xiàn)有干擾,是什么原因?qū)е碌模?/strong>
A:
可以用緩沖液或者純化水對超濾管預(yù)清洗,如果干擾仍然存在,用0.1N氫氧化鈉清洗,然后再用純化水清洗。
Q:
濃縮過程中目的蛋白和超濾膜之間可能存在非特異性吸附,如何改善?
A:
我們采用的是親水性聚醚砜膜,但是對于一些特殊性質(zhì)的蛋白,他們和膜的非特異性吸附可能會增強(qiáng),對于這種情況,可以嘗試在實(shí)驗(yàn)前對超濾管進(jìn)行預(yù)處理,或者聯(lián)系我們工程師。
Q:
濃縮后發(fā)現(xiàn)濃縮液中沒有目的蛋白,可能的原因有那些?
A:
1)蛋白的初始濃度不能太低,濃度太低,膜可能截留不住
2)選擇合適的膜孔徑,超濾管離心濃縮屬于死端過濾,膜孔徑一般小于目標(biāo)蛋白的2倍及以上
3)選擇合適的離心轉(zhuǎn)速
4)目的蛋白是否發(fā)生沉淀
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